En virussignatur er et viruss fingeraftryk. Det er et sæt af unikke data, eller bits af kode, der gør det muligt at identificere det. Antivirus software bruger en virus signatur til at finde en virus i et computer filsystem, så det kan opdage, karantæne og fjerne virus. I antivirusprogrammet betegnes virussignaturen som en definitionsfil eller en DAT-fil.

Flere virus kan have samme virus signatur, som gør det muligt for antivirusprogrammer at registrere flere vira, når de søger en enkelt virus signatur. På grund af denne deling af samme virus signatur mellem flere vira kan antivirusprogrammer til tider registrere en virus, der endnu ikke er kendt. Typisk har nye virusser en virussignatur, der ikke anvendes af andre vira, men nye "stammer" af kendt virus bruger undertiden samme virus signatur som tidligere stammer.

Antivirus software udfører hyppig virus signatur, eller definition, opdateringer. Disse opdateringer er nødvendige for at softwaren kan registrere og fjerne nye vira. Nye vira oprettes og frigives næsten dagligt, hvilket tvinger antivirusprogrammer til brug for hyppige opdateringer.

DAT, sikkerhedsbetingelser, signatur, virus